名称 | PA317 (小鼠成纤维细胞) |
别称 | pA317 |
种属 | 小鼠 |
年龄(性别) | 胚胎 |
组织来源 | 胚胎 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
背景描述 | PA317细胞源自TK-NIH/3T3细胞,通过pBR322中的包装结构DNA(pPAM3)和pBR322中的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因共同转染构建而成。通过感染或转染将逆转录病毒载体导入这些细胞,结果生成可以感染许多哺乳动物细胞的双嗜性载体颗粒。PA317细胞生成的病毒颗粒已成功地用于将基因导入人类,可能因为用于构建PA317细胞而转入的DNA丢失,能够包装逆转录病毒载体的PA317细胞百分比随传代而减少。在含0.03mM次黄嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培养基中短暂(大约5天)选择,可以选出保留了包装功能的细胞。选择后,PA317细胞应在HT培养基(0.03mM次黄嘌呤、0.02mM胸苷)中培养4天,以稀释残留的氨甲喋呤,此后PA317细胞不需选择可以稳定至少1个月。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO温度:液氮 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃ |
保藏机构 | ATCC; CRL-9078 ECACC; 89032007 |